如权利要求21所述的缀合物，其特征在于所述放射性诊断成分包含氟-18，锝-99，钼-99，铷-82，锶-82，铊-201，或它们的组合物。 副甲状腺癌 如权利要求12所述的缀合物，其特征在于所述诊断成分包含放射性诊断成分，荧光成分，量子点，或它们的组合物。 将TCS的基因序列与ELBD突变体核苷酸序列以及H2穿膜肽序列融合表达后，其TCS-ELBD-H2对B16(鼠黑色素瘤细胞)的抑制率显著提高(图7)。 选用11种细胞来研究EGFP-ELBD-HBD重组蛋白的肿瘤靶向性特征。 其中包括9种人体肿瘤细胞：HeLa(人宫颈癌细胞)、Bcap(人乳腺癌细胞)、A549(人肺癌细胞)，A357(人恶性黑素瘤)，T24(人膀胱癌细胞)，MGC-803(人胃癌细胞)，95D(人巨细胞肺癌细胞)，BxPC-3(人胰腺癌细胞)，5637(人膀胱癌细胞)，以及2种正常人体细胞：MRC-5(人胚肺成纤维细胞)，293T(人肾上皮细胞)。
研究发现，EGF与EGFR的专一性识别和结合过程基本代表了此类配体分子与受体的相互作用过程。 EGF的三个环状结构在上、下、中三个部位与EGFR发生相互识别作用，并与之专一性结合，其中以C环的结构最深入EGFR蛋白分子的内部，在与EGFR识别和结合中发挥重要作用5-6。 与EGFR结合的这些配体分子，在空间结构上具有非常类似并保守的三维结构，即配体分子内部通过多肽链内二硫键的作用(Cys6–Cys20，Cys14–Cys31，Cys33–Cys42)而形成典型的三环状结构4。 Ad5基因组含有早期（E1-4)，中期（IX和IVa2)以及晚期（Ll_5)基因，侧翼是左侧和右侧的反向末端重复（分别为LITR和RITR)，所述反向末端重复含有DNA复制所需的序列。所述基因组还含有包装信号（Ψ)和主要晚期启动子（MLP)。 图8b显示了肿瘤内注射Ad5-DM_GMCSF引起了叙利亚仓鼠的血清中高水平的 hGMCSF。 在第4天对用或Ad5-DM_GMCSF处理的动物进行取样并通过FACSARRAY 评估血清中人GMCSF的浓度。
副甲状腺癌: 副甲状腺について
表 5 中报导了根据 RECIST 标准(Therasse P 等人 2000，J NatlCancer Inst 92， )对Ad5-DM-GM-CSF效力的评价。 有趣地，在14位可分析的患者中，观察到了两例完全应答（CR)和五例稳定的疾病（SD)，给出50%的临床获益率。
7.根据前述权利要求中任一项的溶瘤性腺病毒载体，其中编码GM-CSF的核酸序列在病毒E 3启动子的控制之下。 除了客观地测量抗肿瘤活性之外，我们还在数例中见到了临床的和/或主观的益处（表9)。这些包括患者的整体健康改善了，明显感到肿瘤更柔软了和/或更小了以及由肿瘤引起的症状得到了缓解。重要的是，两名之前遭受腹水和/或胸腔积液快速积聚的患者，在病毒治疗后具有所述积聚的清楚的减少，此效果在两例中均持续了数月。 副甲状腺癌 在用Ad5/3-d24-GMCSF治疗前，所有的患者对于Ad5/3-d24_GMCSF都是阴性的。 在第1天，17/19患者在血清中具有可测量水平的病毒基因组，最高的滴度为2061VP/ml血清。
副甲状腺癌: 副甲状腺がんはどんな病気ですか
这些被引入靶细胞中的治疗性基因可以例如，纠正被突变的基因、抑制活跃的致癌基因或对细胞产生其它的性能。 适合的外源治疗性基因包括但不限于免疫治疗性基因、抗血管生成性基因、化学保护性基因和“自杀”基因，并且可利用经修饰的病毒载体或非病毒方法（包括电穿孔、基因枪和脂质或聚合物包被）将它们引入细胞。 本文所述多肽，包括但不限于“肿瘤靶向肽”、“细胞穿膜肽”、“肿瘤细胞靶向性穿膜肽”，其修饰衍生物可采用现有技术领域常规方法对本发明所述的肿瘤靶向肽进行修饰。 这些修饰方法包括对多肽氨基末端或者羧基末端的修饰、中间氨基酸残基的替换、侧链修饰等。 例如，对肽链末端的修饰方法有N端的乙酰化和C末端的酰胺化修饰，从而对末端的氨基或羧基进行保护。
从在第3-7天中所取的样品来看，12/15名患者是阳性的，最高的滴度是3，36xl05vp/ml血清。 总之，数据显示了 Ad5-DM-GM_CSF在免疫活性的携带肿瘤的动物中具有抗肿瘤活性，并且其能够引起肿瘤特异性的免疫性，以至排斥相同肿瘤的随后攻击的程度。 对于荧光素酶检测，为了测试衣壳修饰对转导效力的影响，将细胞接种到两个M 孔板中，50000细胞/孔。 24h后，用Ad51ucl或Ad5/31ucl以2% DMEM中500vp/细胞和 5000/vp/细胞的浓度一式三份感染细胞。 如同在实施例3III中类似地分析荧光素酶的表达（确定中和抗体滴度）。 图7c显示了通过在归档的肿瘤样品中对Ad5-D25_GMCSF的受体CAR(柯萨奇-腺病毒受体）进行染色，而对Ad5-D25-GMCSF转导肿瘤的预测。
副甲状腺癌: 分子標的薬治療
在本发明的另一个优选的实施方式中，所述方法或用途还包括向受试者施用并行的化学疗法。 如在本申请中所用的，“并行的”指在本发明的基因疗法之前、之后或同时施用的疗法。 载体的有效剂量至少取决于需要治疗的受试者、肿瘤类型、肿瘤的位置和肿瘤的阶段。 剂量可变化，例如从约IOeS病毒颗粒（VP)至约10el4VP，优选地从约hl0e9VP至约 10el3VP并且更优选地从约8xl0e9VP至约10el2VP。在本发明的一个特定实施方式中，剂量在约5xl0el0-5xl0ellVP的范围内。
③将培养温度调整到15-20℃范围内，加入适量的IPTG(0.1-10mM)诱导目标蛋白表达，继续培养10-20h，低速离心收集菌体。 副甲状腺癌 ①EGFP-TAT-pET28a质粒构建方案如实施例1中所述。 从保藏菌株的固体LB培养基平板上挑取一个转化有EGFP-TAT-pET28a质粒的单菌落于30ml含有卡那霉素(10-50mg/L)的LB液体培养基中在37℃振荡培养至OD600约为0.5-1.0。 ①EGFP-ELBD-H2-pET28a质粒构建方案如实施例1中所述。
副甲状腺癌: 患者さん向け
图8d显示了通过Ad5-DM-GMCSF诱导肿瘤特异性免疫应答，用Ad5-DM_GMCSF治愈HapTl肿瘤没有保护叙利亚仓鼠免患Hak肿瘤。 用不同的肿瘤再攻击之前用Ad5DM或 Ad5D24-GMCSF治疗过的具有HapTl肿瘤的动物（图8a)，并且随时间测量肿瘤的生长。 图6a显示了腺病毒相伴的（coupled)人GMCSF的表达。用AdOTM或Ad5D24_GMCSF 感染A549细胞系，随时间收集培养基并且通过FACSAR-RAY就GMCSF的表达进行分析。
这一方法结合了常规基因递送的优点与能够复制的试剂的效力。 装备病毒的一个目标是诱导针对允许病毒复制的细胞的免疫反应。 单独的病毒复制虽然是免疫原性的，但是通常不足以诱导有效的抗肿瘤免疫性。 为了强化对治疗性免疫性的诱导，可用激发性蛋白（例如细胞因子）装备病毒，用于促进将肿瘤抗原引入抗原呈递细胞（例如树突细胞），以及用于它们的激发和/或成熟。 将免疫治疗性基因引入肿瘤细胞中以及蛋白质的翻译，导致免疫应答的活化和有效地破坏肿瘤细胞。
副甲状腺癌: 副甲状腺がんの治療(PDQ)
在本发明的优选实施方式中，野生型区域位于El区的上游。 在本发明的优选实施方式中，编码GM-CSF的核酸序列是野生型的。 如本申请中所用的，表述“腺病毒血清型5仏肪）核酸骨架”指Ad5的基因组或部分基因组，其包含选自下列的一个或数个区域：Ad5起源的部分El、pIX、pIVa2、E2、VA1、VA2、 副甲状腺癌 L1、L2、L 3、L4、部分E3、L5和E4。 在另一个优选的载体中，腺病毒核酸骨架大部分源自Ad5并且结合了 Ad3的一部分（例如，衣壳结构的一部分）。
PEG分子或者是进行糖基化修饰，从而增加多肽分子的相对分子量和空间位阻，提高其对多肽水解酶的稳定性，延长在体内循环系统的滞留时间。 同时也可以通过替换个别易酶解的氨基酸残基，或者是将L-型氨基酸替换为D-型氨基酸来延长或改善多肽药物的半衰期。 副甲状腺癌 本发明的基因疗法单独是有效的，但是腺病毒基因疗法与任何其它疗法（例如传统的疗法）的组合可以比单独的任何一个更有效。